【产品名称】巴氏染色液
【规 格】500mL*3/套
【预期用途】适用于临床细胞形态学染色检查。
【包装规格】100mL/瓶;250ml/瓶;500mL/瓶;1000mL/瓶
【检验原理】巴氏染色液中有苏木素、橘黄、伊红、俾士麦棕及亮绿等染料,其中苏木素能与细胞核的核酸结合而显紫蓝色,其他染料可以与细胞浆中不同的化学成分结合而显颜色。
【主要组成成份】本品由苏木精染液(A液)、EA36染液(B1液)、EA50染液(B2液)、橘黄G染液(C液)构成。
【使用方法】
1. 将涂片置于95%乙醇中固定15 分钟以上;
2. 依次浸入80%、50%乙醇中各30 秒,水洗1~2分钟;
3. 浸入苏木精染液中3~5分钟,水洗1~2分钟;
4. 浸入盐酸酒精分化液中分化数秒,水洗1~2分钟;
5. 浸入返蓝液中数秒,水洗1~2 分钟;
6. 置于95%乙醇中漂洗,水洗甩干;
7. 浸入橘黄G染液染中1~3分钟;95%乙醇漂洗、95%乙醇漂洗、乙醇漂洗各一次,时间各10~20秒;
8. 浸入EA36染液(或EA50染液)中染色2~5分钟,95%乙醇漂洗、95%乙醇漂洗、乙醇漂洗各一次,时间各10~20秒;
9. 浸入浸蜡脱蜡透明液中2 分钟;
10. 中性树胶封固;
11. 镜检。
【染色结果】
上皮细胞:胞核呈紫蓝色,核仁红色;胞质受色随分化程度和细胞类型不同可染成蓝绿色、粉红色或桔黄色;红细胞:鲜红色或橙红色。白细胞:胞核蓝紫色,胞质淡蓝或淡绿色;粘液:淡蓝或粉红色。
【注意事项】
1. 涂片厚薄适宜,固定后方可染色。制片用高于95%以上浓度的酒精固定后会出现染色过深,应用95%酒精固定;
2. 苏木素染液上有一层金属膜,下有结晶沉淀,使用前应用滤纸过滤一遍;染色时要轻拿轻放;苏木素染液在染够2000~3000张玻片后应更换新的染液;苏木素的染色时间随气温和染料情况而酌情改变;染液以覆盖涂片为宜,过少蒸发而染料沉淀;
3. 盐酸分化的作用为分化掉胞浆上沾上的苏木素,因此时间不宜长,但如果分化不够,会造成细胞核颜色过深或(及)胞浆很难上色;分化后立即放入自来水中冲洗,不宜久置,否则可使全部颜色消失;
4. 返蓝过程亦称碱化,返蓝偏短,苏木色精形成不充分,影响染色效果。碳酸锂每缸过500张玻片更新;温水更换的频率当更高;
5. 橘黄G染色时间不宜过长,否则EA50不易上色。橘黄每缸过1000张玻片更新;
6. EA50或EA36使用前要充分搅拌,染色过程中提拿、旋转染色架数次。每缸过1000~1800张玻片后更新;
7. 技术人员操作要流畅,动作干净利落,不可把上一缸染色液带入下一缸,每缸交替时要甩干玻片上残存液体;
8.细胞浆着色不佳应考虑因素
8.1 如果全片内胞浆都淡染,则需要延长染色时间或更换新液;
8.2 如果胞浆不分色或均为浅红色,适当增加染色时间能够部分纠正不分色状况;
8.3 胞浆染成灰色或紫色是由于苏木素染色时间过长或盐酸分化不佳,经过褪色后重新苏木素染色可以纠正;
8.4 由于标本的不同,同样配方的EA染液可造成偏蓝、偏绿和偏红,对不同的标本应该使用不同的EA染液。一般认为,EA36和EA50较适用于妇科标本,而EA65或改良EA较适用于非妇科标本;
8.5胞浆不分色的另一重要原因是由于EA染液的pH值不恰当所致。如染色为红色,可加少许磷钨酸溶液纠正;如染色均为蓝色或绿色,可加少许饱和碳酸锂溶液纠正。对于改良EA染液,每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳,染液使用更持久。
9. 细胞核着色不佳应考虑因素
9.1细胞核着色过浅
9.1.1盐酸分化时间过长或苏木素染液时间过长,需要缩短分化时间或延长碱化时间;每日加入少量新鲜苏木素染液或重新配制苏木素液;
9.1.2在固定之前制片干燥,所以对巴氏染色的制片需要严格遵守湿固定的原则;
9.1.3自来水的pH值偏酸性,应使用碱性溶液。
9.2细胞核着色过深
9.2.1盐酸溶液浓度不够,适当加入几滴盐酸以增加浓度。
【储 存】密封,阴凉处保存。
【有 效 期】未开封条件下储存,有效期1年。
【生产企业】南昌雨露实验器材有限公司
【公司生产及注册地址】:江西省南昌市南昌高新技术产业开发区天祥大道2799号佳海产业园157栋